Shinkawa T
Shinkawa T., Nakamura K., Yamane N., Shoji-Hosaka E., Kanda Y., Sakurada M., Uchida K., Anazawa H., Satoh M., Yamasaki M., Hanai N., Shitara K. taient ns [1]. Directement issue de travaux des annes 1960 portant sur la fusion cellulaire et la synthse de l’ADN, mens notamment par Georges Barski, Boris Ephrussi et John Littlefield, la technique de production des AcM par fusion cellulaire avec des cellules de mylome de lymphocytes B provenant de souris immunises fut initialement mise au point pour rpondre des questions d’immunologie fondamentale. En effet, les rgles gouvernant l’expression, la synthse et l’association des cha?nes lourdes (H) et lgres (L) des anticorps dans les lymphocytes B, ainsi que les relations existant entre spcificit et association H/L taient alors mal dfinies, ce qui conduisit divers immunologistes rechercher de nouveaux outils cellulaires permettant d’explorer ces diffrentes questions. De telles cellules hybrides se multiplient indfiniment en donnant naissance des populations de cellules filles identiques entre elles et en fabriquant les anticorps que les lymphocytes B provenant des animaux immuniss produisaient. Chaque clone de cellules filles produit le mme anticorps, qui est dit ? monoclonal ?, un phnomne fond sur le fait qu’un lymphocyte B ne produit qu’un seul type d’anticorps ayant une spcificit donne. On dispose alors d’une source illimite de cellules produisant, au moins en thorie, toujours le mme anticorps ayant la mme affinit et les mmes proprits physico-chimiques. La dcouverte des AcM suscita immdiatement de nombreux espoirs thrapeutiques. Cependant, alors que des avances considrables dans le domaine de la recherche fondamentale et dans celui du diagnostique furent faites rapidement, d’importants problmes surgirent lorsque l’utilisation des AcM chez des patients fut envisage. Outre la question de l’obtention d’anticorps de haute affinit dirige contre des cibles spcifiques pertinentes, deux problmes lis l’utilisation itrative d’un anticorps de souris ou de rat chez l’homme apparurent rapidement : (C CDRs C de fragments recombinants scFv (ou permet galement de gnrer des anticorps de haute affinit par mutation dirige ou par mutation alatoire, imitant ainsi le phnomne d’hypermutation observ lors de la maturation des rponses anticorps in vivo. De trs nombreuses adaptations de la technique du (YACs) [31], [32]. Des souris dont une grande partie des loci IgH et Ig avait t inactive (moIgK.O.) et des souris transgniques contenant une partie des loci d’Ig humaines (huIgTg) ont t gnres et croises. Il a t alors montr que les souris issues de LRE1 ce croisement [huIgTg moIgK.O.] produisent des anticorps humains de type IgM, ou IgG lors de rponses secondaires, dmontrant que les fragments introduits permettent l’expression des cha?nes lourdes et lgres humaines, ainsi que la commutation de classe. De plus, l’analyse des AcM obtenus a montr que des mutations somatiques affectaient les rgions variables lors de la rponse secondaire, indiquant l’existence d’une maturation de la rponse anticorps. Ces souris permettent ainsi de gnrer des AcM humains de haute affinit contre Rabbit Polyclonal to TRERF1 n’importe quel antigne [31], [32]. Une approche fonde sur l’introduction de LRE1 fragments chromosomiques humains entiers (technologie ? trans-chromosomique ?, Tc) a t galement dveloppe [33]. Des souris invalides en ce qui concerne leurs loci IgH et Ig ont t rendues double-trans-chromosomiques par introduction de fragments drivs des chromosomes humains 14 et 22 contenant respectivement le locus et le locus surface display library. Nat. Biotechnol. 2003;21:163C170. [PubMed] [Google Scholar] 31. Lonberg N., Taylor L.D., Harding F.A., Trounstine M., Higgins K.M., LRE1 Schramm S.R., Kuo C.C., Mashayekh R., Wymore K., McCabe J.G. Antigen-specific human antibodies from mice comprising four distinct genetic modifications. Nature. 1994;368:856C859. [PubMed] [Google Scholar] 32. Green L.L., Hardy M.C., Maynard-Currie C.E., Tsuda H., Louie D.M., Mendez M.J., Abderrahim H., Noguchi M., Smith D.H., Zeng Y. Antigen-specific human monoclonal antibodies from mice designed with human Ig heavy and light chain YACs. Nat. Genet. 1994;7:13C21. [PubMed] [Google Scholar] 33. Tomizuka K., Shinohara T., Yoshida H., Uejima H., Ohguma A., Tanaka S., Sato K., Oshimura M., Ishida I. Double trans-chromosomic mice: maintenance of two individual human chromosome fragments made up of Ig heavy and kappa loci and expression of fully human antibodies. Proc. Natl Acad. Sci. USA. 2000;97:722C727. [Article PMC gratuit] [PubMed] [Google Scholar] 34. Cochet O., Kenigsberg M., Delumeau I., Virone-Oddos A., Multon M.-C., Fridman W.H., Schweighoffer F., Teillaud J.-L., Tocqu B. Intracellular expression of an antibody fragment.